过氧化氢酶试验
1 原理
黄酶系统的呼吸酶最后把氢交给分子氧而形成过氧化氢,过氧化氢对活细胞有毒,过氧化氢酶的作用是使过氧化氢分解为新生态氧。2H2O2 → 触酶 → 2H2O+ O2↑
2 试剂
3%的过氧化氢水溶液(新鲜配制)。
3 方法
挑取固体培养基上的菌落1接种环,置于洁净玻上(或试管内)滴加3%的过氧化氢溶液数滴,观察结果。
4 结果判定
于半分钟内有大量气泡产生者为阳性,不产生气泡者为阴性。
5 用途
绝大多数细菌均产生过氧化氢酶,但链球菌的触酶阴性,故常用此试验来鉴定链球菌。此外,金氏杆菌属细菌的触酶也阴性,因此,此试验在鉴定这些细菌时有特异性。
6 注意事项
6.1 做触酶试验不宜用血琼脂平板上的菌落,因红细内含有触酶,会出现假阳性反应,最好用营养琼脂或培养基。
6.2 本实验必须用18 ~ 24小时培养物,因陈旧培养物可能丢触酶活性,而出现假阴性反应。
6.3 此试验一定要用阳性及阴性菌株做对照,可ATCC25923(金黄色葡球菌)做阳性对照菌,用链球菌做阴性对照菌。
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